NH2氨基色谱柱使用和清洗方法
已有 1412 次阅读 2017-08-09 15:24 NH2氨基色谱柱使用和清洗方法
NH2氨基色谱柱的使用:
需要注意的是,NH2氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水
解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。
反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的
比例越高当然也越有发生水解的危险。所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和
将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。
有一种情况是,当使用NH2氨基色谱柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物
质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于
某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。
NH2氨基色谱柱的清洗
(1)平时在正相条件下使用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大需适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗
;之后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。
(2)平时在反相条件下使用:
缓冲盐应及时冲洗,不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待。
用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回
来到甲醇条件下。
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